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大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)說(shuō)明書(shū)
發(fā)布時(shí)間:2025/10/21瀏覽:41次
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  大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)說(shuō)明書(shū)

  BS-2901大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒

  一、產(chǎn)品概述

  本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù),專用于體外定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、組織勻漿等樣本中第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)的濃度。其核心原理為:預(yù)包被抗體的微孔板捕獲樣本中的FⅧAg,再通過(guò)酶標(biāo)記抗體形成復(fù)合物,經(jīng)底物顯色后,通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度(OD值),濃度與顯色強(qiáng)度呈正相關(guān)?。該技術(shù)具有高靈敏度(檢測(cè)限低至0.008 IU/mL)和特異性,適用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床診斷?。

  二、試劑盒組成

  預(yù)包被微孔板?:96孔格式,含固定化捕獲抗體?。

  校準(zhǔn)品?:標(biāo)準(zhǔn)濃度梯度(如80、40、20、10、5、2.5 U/L),用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

  對(duì)照品?:陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照血漿,驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有效性?。

  酶標(biāo)記物?:辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體?。

  底物溶液?:TMB顯色液,反應(yīng)后呈藍(lán)色,終止后轉(zhuǎn)黃色?。

  終止液?:硫酸溶液,終止酶促反應(yīng)。

  樣本稀釋液?:用于樣本預(yù)處理,避免高濃度樣本超出檢測(cè)范圍。

  洗滌緩沖液?:濃縮液,需按比例稀釋使用?。

  三、樣本處理與保存

  血清/血漿?:離心分離(3000×g,10分鐘),避免溶血或脂血;EDTA、肝素或檸檬酸鹽抗凝血漿均可使用。

  組織勻漿?:生理鹽水勻漿后離心取上清。

  保存條件?:短期(2-8℃)或長(zhǎng)期(-70℃)保存,避免反復(fù)凍融;室溫解凍后充分混勻。

  四、操作步驟

  準(zhǔn)備試劑?:室溫平衡試劑20分鐘,洗滌緩沖液稀釋后使用?。

  加樣?:每孔加入50μL樣本或校準(zhǔn)品,37℃孵育1小時(shí)。

  洗滌?:棄液后,洗滌緩沖液清洗3次,每次3分鐘?。

  加酶標(biāo)記物?:加入HRP標(biāo)記抗體,37℃孵育1小時(shí)?。

  再次洗滌?:重復(fù)洗滌步驟?。

  顯色?:加入TMB底物,37℃避光孵育10-30分鐘。

  終止反應(yīng)?:加入終止液,溶液由藍(lán)轉(zhuǎn)黃?。

  檢測(cè)?:酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。

  五、注意事項(xiàng)

  操作規(guī)范?:嚴(yán)格遵循孵育時(shí)間和溫度,避免交叉污染?。

  樣本要求?:避免溶血或高脂樣本,稀釋后檢測(cè)超出范圍的樣本。

  試劑保存?:2-8℃避光保存,有效期6個(gè)月;濃縮洗滌液需溶解后使用?。

  儀器校準(zhǔn)?:使用高精度加樣器(0.5-1000μL)和450nm酶標(biāo)儀。

  安全提示?:僅限科研用途,操作時(shí)佩戴防護(hù)裝備?。

  六、性能驗(yàn)證

  靈敏度?:檢測(cè)限低至0.008 IU/mL,可準(zhǔn)確識(shí)別低濃度樣本?。

  精密度?:板內(nèi)變異系數(shù)<10%,板間變異系數(shù)<15%,確保結(jié)果重現(xiàn)性?。

  線性范圍?:標(biāo)準(zhǔn)曲線覆蓋2.5-80 U/L,樣本稀釋后仍保持線性。

  特異性?:與結(jié)構(gòu)類似物無(wú)交叉反應(yīng),避免假陽(yáng)性?。

  七、應(yīng)用范圍

  本試劑盒適用于大鼠FⅧAg的定量分析,支持疾病機(jī)制研究、藥物開(kāi)發(fā)等科研場(chǎng)景,提供穩(wěn)定可靠的檢測(cè)數(shù)據(jù)。

  注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒

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