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如何選擇ELISA試劑盒?關(guān)鍵檢測方法解析
更新時間:2025-10-16瀏覽:145次

  如何選擇ELISA試劑盒?關(guān)鍵檢測方法解析

  選擇ELISA試劑盒需首先明確檢測目標(biāo)(大分子蛋白或小分子抗原)及樣本類型,再根據(jù)檢測原理匹配方法:

  1. ?雙抗體夾心法?

  適用于二價及以上大分子抗原(如細胞因子、抗體),通過捕獲抗體和檢測抗體形成“夾心"結(jié)構(gòu),特異性高且靈敏度強?。但需確??乖鄠€表位,且需優(yōu)化抗體對以避免交叉反應(yīng)?。

  2. ?競爭法?

  針對小分子抗原,通過待測物與酶標(biāo)抗原/抗體競爭結(jié)合位點,顯色信號與待測物濃度成反比?。優(yōu)勢在于可檢測不純樣本,但敏感性和專一性較低?。

  3. ?間接法?

  通過酶標(biāo)二抗放大信號,靈敏度高且經(jīng)濟靈活,常用于抗體效價檢測?。但需注意二抗可能與非目標(biāo)蛋白結(jié)合導(dǎo)致背景升高?。

  4. ?直接法?

  步驟簡單,適合快速檢測,但靈敏度低且需標(biāo)記每種一抗,成本較高?。

  選擇建議

  大分子蛋白?:優(yōu)先雙抗體夾心法?;

  小分子抗原?:選擇競爭法?;

  樣本復(fù)雜度?:高背景樣本需優(yōu)化封閉和洗滌步驟?;

  靈敏度要求?:低豐度目標(biāo)需高敏試劑盒(pg/mL級)?。

  注意事項

  驗證試劑盒的批間精密度(CV<15%)和加標(biāo)回收率(80%~120%);

  特殊樣本(如高脂血清)需預(yù)處理或選擇適配試劑盒?。

  注:以上僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。

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